Rhod-2AM 是一種常應(yīng)用于細(xì)胞鈣離子檢測(cè)的熒光探針，尤其在 線粒體鈣信號(hào)（Mitochondrial Ca2? Signaling） 研究中具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，在細(xì)胞生物學(xué)研究中發(fā)揮著重要作用。

1.為什么選擇 Rhod-2AM 研究線粒體鈣？

高靈敏度：對(duì)低濃度 Ca2?（~nM-μM 范圍）響應(yīng)靈敏。

線粒體靶向性：優(yōu)于其他鈣探針（如 Fluo-4、Fura-2），減少胞質(zhì)信號(hào)干擾。

雙模式檢測(cè)：適用于熒光顯微鏡（實(shí)時(shí)成像）和流式細(xì)胞術(shù)（群體分析）。

多通道兼容性：可與綠色熒光探針（如Fluo-4 AM）或藍(lán)色核染料（如Hoechst）聯(lián)用，實(shí)現(xiàn)多參數(shù)分析。

2.應(yīng)用場(chǎng)景示例

線粒體鈣與細(xì)胞凋亡：檢測(cè)凋亡刺激（如 STS）下線粒體鈣超載與 mPTP 開放的關(guān)系。

能量代謝研究：結(jié)合 Seahorse 分析儀，關(guān)聯(lián)鈣信號(hào)與 OXPHOS 效率。

神經(jīng)元活動(dòng)：研究突觸后線粒體鈣瞬變（如與電生理聯(lián)用）。

3.使用技巧與注意事項(xiàng)

  3.1優(yōu)化染色條件

A.細(xì)胞密度：建議1X105 cells/mL，避免過度擁擠影響染料加載。

B.孵育時(shí)間：30-45分鐘（37℃），過長可能導(dǎo)致染料外排或細(xì)胞毒性。

3.2干擾因素控制

A. 避免使用含血清培養(yǎng)基（酯酶活性干擾），加載后徹底清洗減少背景信號(hào)。

B. 線粒體膜電位崩潰劑（如CCCP）可驗(yàn)證染料定位特異性。

3.3數(shù)據(jù)分析：

使用比率法（如與TMRM聯(lián)用）校正膜電位變化對(duì)熒光強(qiáng)度的影響。

圖示：